|
Сывороточный альбумин и глобулин Уровень белка измеряется в сыворотке. Это жидкость, остающаяся после того, как плазма свернётся, при этом из плазмы удаляются фибриноген и факторы свёртывания крови (плазма = сыворотка + фибриноген). В норме белок составляется 6-8 г/дл, альбумин - 3,5-5,0 г/дл, остальное составляет глобулин. Значения могут значительно вариьровать в зависимости от лаборатории. Техника определения. Широкораспространённым методом является биуретовая реакция. Принцип её заключается в том, что сывороточный белок реагирует с CuSO4 и NаОН с образованием фиолетового "биуретового" комплекса. Интенсивность биуретовой окраски пропорциональна концентрации белка. Альбумин обычно измеряют с помощью красителя бромкрезол зелёного, с которым альбумин способен формировать стабильный комплекс. Комплекс бромкрезол зелёный + альбумин поглащает свет определённой волны, отличный от несвязанного красителя. Этот метод может преувеличить уровень альбумина из-за связывания бромкрезол зелёного с другими белками. Фракция глобулина обычно считается путём вычитания альбумина от общего белка. Следующие методы исследования белков - электрофорез и иммуноэлектрофорез. Иммуноэлектрофорез используется для оценки гамма-фракции. Для каждого типа ИГ используются специфические сыворотки. Определяют, увеличение ли это одного типа ИГ (моноклональное) или нескольких типов ИГ (поликлональное). Альбумин составляет более половины белка сыворотки (60%). В кровеносном русле находится 30-40% всего альбумина организма. Остальное находится в интерстициальном пространстве, главным образом в мышцах и коже. В малых количествах альбумин также обнаруживается в физиологических жидкостях, таких как пот, слёзы, желудочный сок, желчь. Альбумин не диффундирует через неповреждённую эндотелиальную выстику. Таким образом, это главный белок, обеспечивающий коллоидное осмотическое и онкотическое давление, которое регулирует пассаж воды и расворимых веществ через капилляры. Альбумин обеспечивает 70% коллоидного осмотического давления. Он обеспечивает большее осмотическое давление, нежели б давало такое же количество молекул, расворённых в плазме. Вследствие этого альбумин не может быть полностью замещён инертными веществами, такими как декстран. Причина этого связано с тем, что отрицательно заряжённый при нормальном рН альбумин связывает катионы, особенно Nа в кровеносном русле. Это называется эффектом Гиббса-Доннана. Альбумин связывает также небольшое количество хлора, что усиливает его отрицательный заряд и способность связывать Na-ионы в кровеносном русле. Этот эффект усиливает осмотическое давление на 50%, чем это давала только лишь концентрация белка. Альбумин транспортирует билирубин, гормоны, металлы, витамины, ЛВ. Он играет важную роль в метаболизме липидов путём связывания жирных кислот и сохраняя их в расоримом состоянии в плазме. Это одна из причин почему гиперлипидемия встречается при гипоальбуминемии. Связывание альбумина с гормонами регулирует их количество в плазме. Альбумин синтезируется в печени. Скорость синтеза постоянная и у нормальных индивидуумов составляет 150-250 мг/кг/день, приводя к продукции 10-18 г альбумина в день у 70 кг человека. Печень способна продуцировать в два раза больше альбумина. Первичные факторы, которые влияют на синтез альбумина, - это поступление белков и а-т с пищей, осмотическое давление, действие некоторых гормонов и заболевания. Голодание или низкобелковая диета снижают синтез альбумина на время, на которое будет длиться голодание. При увеличении а-т в крови, притекающей в печень по портальной вене, увеличивается и синтез альбумина. Снижение коллоидного давления служит стимулом для синтеза альбумина. Тиреоидные гормоны, ГКС, гормон роста, инсулин также повышают синтез альбумина. Место разрушения альбумина не известно. Он распадается на а-ты, которые используются для энергии клетки или идут во внеклеточное пространство. Фракция глобулинов составляет сотни сывороточных белков, которые являются переносчиками, ферментами, комплементом и ИГ-ами (иммуноглобулинами). Большинство из них секретируется в печени, хотя ИГ секретируются плазматическими клетками. Глобулины при электрофорезе разделяются на 4 группы - альфа1, альфа2, бета и гамма. Повышение уровня глобулинов обычно является следствием повышение ИГ, однако может быть повышение и других видов глобулинов. Снижение питания и врождённые иммунодефициты могут вызвать снижение уровня глобулинов вследствие снижения их синтеза. При нефротическом синдроме их количество снижается из-за потери белка через почки. ИГ входят в группу гамма, однако некоторые могут в бета и в альфа2. Каждая молекула ИГ состоит из двух тяжёлых цепочек, которые одинаковы, и двух лёгких цепочек, которые различны. 3/4 ИГ в норме - это тип IgG. Клиническое значение. Повышение альбумина бывает только при острой дегидратации. Большинство патологических состояний снижают уровень альбумина, либо из-за снижения синтеза, либо из-за повышения потери. Снижения синтеза встречается при заболеваниях печени, мальабсорбции, низкобелковой диете. Повышение потери - при нефротическом синдроме и тяжёлых ожогах. Последствиями снижения альбумина является транспорт воды из внутрисосудистого пространства в интерстицию, приводя к снижению ОЦК и отёкам. Любое повышение или снижение глобулинов должно оцениваться электрофорезом. Альфа1-фракция главным образом состоит из альфа1-антитрипсина. Значительное снижение этой фракции встречается при врождённой недостаточности альфа1-антитрипсина. Повышение наблюдается при воспалении, т.к. альфа1-антитрипсин является острофазовым белком. Альфа2 - включает а2-макроглобулин и гаптоглобин. а2-макроглобулин повышается при нефротическом синдроме, когда с мочой теряются белки с меньшей молекулярной массой. Гаптоглобин повышается в ответ на стресс, инфекцию, острое воспаление и некроз ткани, вероятно вследствие стимуляции синтеза. Уровень гаптоглобина снижается после гемолиза, т.к. гаптоглобин связывается со свободным гемоглобином и элиминируется из циркуляции. Бета-группу составляет трансферрин. Повышение его наблюдается при недостаточности железа. Компоненты С3, С4, С5 комплемента также мигрируют при электрофорезе в эту зону. Наиболее частое нарушение в гамма-регионе - это узкое моноклональное или широкое поликлональное повышение. Поликлональное повышение встречается при хронических инфекцих, заболеваниях соединительной ткани и заболеваниях печени. Моноклональное увеличение - при множественной миеломе, макроглобулинемии Вальденстрёма, первичном амилоидозе, лимфоме или моноклональной гаммопатии. Любое нарушение в гамма-регионе должно в дальнейшем оцениваться путём иммуноэлктрофореза. Гипогаммаглобулинемия характеризуется снижением гамма-компонента. Оно встречается при врождённых иммунодефицитах или при заболеваниях, таких как нефротический синдром, хронический лимфоцитарный лейкоз, лечение ГКС. |
